液相鬼峰原因及結(jié)果處理

一、溶劑問(wèn)題

1.有機(jī)溶劑

甲醇制備工藝相較乙腈的制備工藝來(lái)說(shuō)較為簡(jiǎn)單，其雜質(zhì)含量也較少。但甲醇紫外吸收范圍比乙腈廣，當(dāng)使用紫外檢測(cè)器尤其波長(zhǎng)較低時(shí)，用甲醇做有機(jī)相會(huì)導(dǎo)致漂移太大產(chǎn)生問(wèn)題。而用作梯度色譜的乙腈質(zhì)量要求較高，采用進(jìn)口梯度色譜專(zhuān)用乙腈能夠很好的減少鬼峰的出現(xiàn)。而且如果有機(jī)相使用完后未更換新的流動(dòng)相瓶，直接添加補(bǔ)充到舊的流動(dòng)相瓶也有可能會(huì)產(chǎn)出鬼峰。

2.水

要保證水的“干凈”，避免水中含有較多的雜質(zhì)，盡量用HPLC級(jí)的純水并且水相要現(xiàn)配現(xiàn)用，避免微生物滋長(zhǎng)。

3.其它試劑

緩沖鹽、TFA、EDTA等試劑也會(huì)對(duì)流動(dòng)相造成很大的影響，盡量用純度高的試劑配制流動(dòng)相。

二、儀器問(wèn)題

1.液相的流動(dòng)相管路被污染

長(zhǎng)時(shí)間使用含水量較高的流動(dòng)相（尤其是加入了緩沖鹽），細(xì)菌很容易在管路中滋生，細(xì)菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物或是細(xì)胞碎片會(huì)造成鬼峰出現(xiàn)。

2.檢測(cè)器樣品殘留

一些樣品組分在檢測(cè)器流通池內(nèi)殘留，從而產(chǎn)生鬼峰的情況，這種情形，需要對(duì)流通池進(jìn)行徹底清洗。

3.單向閥堵塞

由于單向閥堵塞而造成系統(tǒng)壓力不穩(wěn)，從而產(chǎn)生鬼峰。

4.色譜柱中組分殘留

色譜柱可對(duì)流動(dòng)相或系統(tǒng)流路內(nèi)的強(qiáng)保留污染組分起到富集作用，在有機(jī)相比例隨梯度程序變化的過(guò)程中而被沖洗出來(lái)，污染組分殘留會(huì)導(dǎo)致鬼峰的出現(xiàn)。

三、流動(dòng)相殘留氣泡

這種情況下可將流動(dòng)相超聲或鼓He脫除氣泡并打開(kāi)purge閥，大流速?zèng)_出儀器管路中的氣泡，來(lái)減少氣泡引起的鬼峰現(xiàn)象。

四、操作問(wèn)題

1.流動(dòng)相配置過(guò)程中受到污染

主要是盛放流動(dòng)相的容器或是樣品瓶受到污染。這種污染可能來(lái)自于洗滌劑、鉻酸洗液或是其他實(shí)驗(yàn)人員用完后的殘留雜質(zhì)。有時(shí)流動(dòng)相容器的塑料蓋碎片都有可能是雜質(zhì)的來(lái)源。對(duì)于樣品瓶污染情況下的鬼峰，容易排除，僅需要分別將樣品溶解或稀釋用的試劑以及進(jìn)樣小瓶更換，即可確定鬼峰的來(lái)源。

2.樣品稀釋液與流動(dòng)相極性或者pH相差太大

這也是導(dǎo)致鬼峰的原因之一，這種問(wèn)題很有可能導(dǎo)致樣品分為兩個(gè)不同的階段出峰，從而產(chǎn)生雙峰或者多峰。

討論到這里，大家可以看到鬼峰的來(lái)源多種多樣的，除了避免實(shí)驗(yàn)操作錯(cuò)誤、溶劑和儀器錯(cuò)誤導(dǎo)致鬼峰出現(xiàn)，使用鬼峰捕集柱能大大減少鬼峰的出現(xiàn)。鬼峰捕集去除柱也稱(chēng)鬼峰小柱，將鬼峰捕集柱安裝在梯度混合器和自動(dòng)進(jìn)樣器之間，不僅能夠去除流動(dòng)相中的雜質(zhì)，還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。柱芯容積約700μL，耐壓＞35Mpa，有多種尺寸、規(guī)格可供選擇。