薄層色譜(Thin Layer Chromatography，TLC)在藥物尤其在植物藥成分的定性和定量分析方面早已有了非常廣泛的應用。隨著科學技術的發展以及新材料的應用，使其得到了很大發展，出現了許多新技術，如高效薄層色譜、假相薄層色譜、反相薄層色譜、微乳薄層色譜在中藥藥物分析中已有一定的應用。TLC在規范化、儀器化方面均取得了長足的進步，在大批量樣品及某些特殊樣品的快速分析中，顯示了分析容量大、可采用特征專屬的顯色劑以及極低的溶劑消耗等優勢。

　　近年來TLC廣泛應用于有機化合物的分析鑒定、植物藥有效部位的分離精制、有機合成、結構分析、生物測定等，尤其在研究開發植物藥有效部位和中成藥質量控制中，是用于定性、定量分析的最簡便的科學方法。但TLC亦有其缺陷，其色譜結果易受鋪板質量、點樣技術、展開劑配制、層析環境中展開劑的飽和度、環境溫濕度等因素的影響，有時難于重復；顯色又受均勻性、靈敏度、穩定性等影響，這均使測定結果偏差較大。最近幾年圍繞著測定過程的標準化和自動化，薄層色譜技術有了全新的發展，擴大了TLC技術在中藥藥物定性定量分析中的應用。前一節，我們譜析儀器介紹了薄層色譜法在食品安全監測領域的運用，這節我們介紹下薄層色譜在藥物分析中的應用，供大家參考。

　　中藥材的鑒別

　　用薄層色譜進行指證性鑒別，它們之間的關系是共性與個性的關系。制備試藥生藥-共性化合物-共性特征(指示性的)薄層色譜個性化合物個性特征(Rf值、顏色)薄層色譜為生藥提供了一個可信的“身份”，它可以提供分子水平上的鑒別作用，從而確定是不是認定的生藥，是不是道地的生藥，是不是已失效的生藥。

　　藥典2005版一部規定，人參和西洋參的鑒別必須使用薄層色譜法。取人參及西洋參粉末各19，制成供試品溶液；另取它們的對照藥材19，同法制成對照藥材試液，再取人參單體皂普Rbl、Re、Rgl、Rf和擬人參皂昔Fll制成對照品溶液，于同一硅膠G薄層板上進行色譜層析，規定供試品譜中，在與對照藥材色譜及對照品色譜相應的位置上，在日光及紫外光(365nm)下，分別顯相同顏色的斑點或熒光斑點。在這里我們可以看到，人參分子特征是人參皂營單體，其偽品異類不具備這種分子個性特征，而且同屬不同種的人參和西洋參分子特征亦不同，人參特含皂普Rf，而西洋參則特含擬人參皂昔Fll。這在某種程度上給我們規定了人參特征譜系。這種分子的不同、譜系的不同，就區別了藥材的異同。

　　在中成藥及其復方制劑方面，趙志軍等建立了益康膠囊的T LC 鑒別方法，對方中組成藥物人參、黃芪、何首烏、丹參及甲基橙皮苷進行鑒別。結果，斑點清晰，分離效果好，專屬性強，陽性對照無干擾。金陽研究破壁靈芝孢子粉膠囊的TLC 鑒別方法，通過對集中提取及展開系統的比較，對破壁靈芝孢子粉的鑒別選擇GF254 板，用石油醚(60℃~ 90℃)-甲酸乙酯-甲酸( 15：5：1) 的上層溶液為展開劑。結果，鑒別效果好，能很好地把破壁靈芝孢子粉和靈芝區別開來。

　　植物藥成分的鑒別

　　TLC 法在植物藥成分鑒別方面的應用已極為廣泛。印度M.S.大學的Murthy 等在2008 年首次報道了關于莕菜屬植物中樺木酸的TLC檢測方法，該方法將2.5g根粗粉用25mL甲醇溶液水浴加熱回流提取30min，同法提取4 次后合并提取液，濾過、離心后制成一定濃度的甲醇溶液。將該樣品溶液與樺木酸甲醇對照液同時在TLC硅膠G60 F254預制板上點樣，用環己烷2醋酸乙酯2冰醋酸(7∶3∶0.03)溶劑系統展開，30 min后取出吹干，用茴香醛2硫酸溶劑噴淋，110℃加熱3 min顯色，斑點在紫外2可見光下檢視，結果顯示分離效果良好，Rf=0.60。該方法在樺木酸的檢測方面以快速、簡便、準確的特點優于其他方法。

　　新德里生物技術研究所的Ram等在對多種藥用植物的研究中建立了一種甲羥戊酸的快速TLC檢測方法,實驗對象包括黃花蒿、補骨脂、長春花、催眠睡茄、黃葉假杜鵑等藥用植物的葉，方法采用硅膠G60 F254預制板，展開系統選用苯2丙酮(3:2)，先將薄層板在甲醇中浸泡1h去除雜質，干燥后備用。粉碎的植物葉片用色譜純醋酸乙酯提取，與對照品醋酸乙酯溶液同時點樣展開，室溫30℃，相對濕度55%，衍生試劑為0.05mL/mL茴香醛醋酸溶液-乙醇-97%硫酸(10:85:5)，110℃下加熱5 min顯色。該方法簡單、快速、靈敏度高。布達佩斯的Ligor等研究了多種茶葉中活性物質黃酮類的TLC檢測方法,提出將經典液相萃取提取方法(LE)和超臨界液體萃取法(SFE)作比較，并用TLC法檢測在不同提取方法下活性成分的量。

　　化學藥品及復方制劑

　　近年來TLC法以其快速、簡便、準確的特點，在化學藥物成分的研究中仍有很多應用。波蘭J agiellonian大學的Starek等利用TLC法對抗炎藥吡羅昔康的多種劑型及其降解產物進行了研究測定，其中，膠囊和注射劑用丙酮溶解，片劑在0.5mol/L的鹽酸溶液中水浴加熱至60℃，再制成丙酮溶液。該方法的展開系統為醋酸乙酯-甲苯-氨基丁烷(2:2:1)，紫外吸收法測定檢測波長360nm。研究結果表明，吡羅昔康的穩定性良好，不易降解，且在堿性環境下比酸性環境更穩定，其降解產物為嘧啶-2-胺和2-甲基-2,3-二氫-4 H-1 ,2-苯并噻唑-1 ,1 ,4-三酮。該方法穩定可靠，快速準確，可用于該類藥物的分析鑒定。

　　波蘭Jagiellonian大學的Ekiert等用TLC測定唑類抗真菌劑，這是抗真菌唑類藥物成分檢測的新方法，目前鮮有報道。該實驗對酮康唑、聯苯芐唑、氟康唑和伊曲康唑4種抗真菌劑進行了測定，前3種用甲醇溶解定量，伊曲康唑用氯仿溶解，并制成甲醇溶液。經選擇TLC板用硅膠60F254熒光板，展開系統選用正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸(42:40:15:2:1)，UV檢測波長260nm。該法準確簡便，專屬性強，可作為抗菌素類藥物TLC法研究的參考。

　　藥品的親脂性是指某分子或分子的一部分對類脂環境的親和性，有機化合物的親脂性可以影響它們的吸收、分布、代謝和排泄等，所以藥品的親脂性研究對于藥品的生物利用度的預測有著重要意義。傳統的親脂性研究是用液-液分配的方法測定，比較費時繁瑣，反相TLC法親脂性研究方法的引入解決了這一問題。

　　Hamryt等用RP2TLC方法研究了12個精神類藥物的親脂性。選用Merck C18硅膠F254HPTLC薄層板(10cm×10cm)，考察了多種流動相組合，結果表明最好的流動相為：甲醇-水-0.01mol/L SDS-10%醋酸鹽緩沖液(pH4.75)、醇-水-1%氨水、乙腈-水-1%氨水和二氧六環-水-1%氨水；而Cserely等用相對于反相TLC板便宜的石蠟油涂層的硅膠板研究了12種血管緊張素轉化酶抑制劑(ACE)的親脂性，其薄層板的制備方法為：TLC硅膠板用10%石蠟的正己烷溶液連續展開18h，以石蠟油飽和TLC硅膠顆粒涂層，板經干燥后在48 h內使用，流動相則選擇不同比例的乙腈-水-氫氧化銨溶液，用樣品的Rf值計算相應的親脂性。

　　藥品雜質檢驗

　　有關物質檢查通常采用色譜法，可根據有關物質的性質選用專屬性好，靈敏度高的薄層色譜，高效液相色譜(HPLC)及氣相色譜(GC)法。薄層色譜法設備簡單，操作簡便，但因影響重現性和精密度的因素較多，可用作一般有關物質檢查。采用反相薄層色譜法，建立了阿德福韋酷有關物質檢查法。以反相高效F254薄層板(HPTLC RP18 F254)為吸附劑，以甲醇一水(3:1)為展開劑，在紫外光燈254nm下檢視，阿德福韋醋與其有關物質的分離狀況良好，檢測靈敏度高，最小檢測限為0.1微克。采用薄層色譜法，建立了雌三醇栓中有關物質的檢查方法，以硅膠G板為吸附劑，以氯仿-甲醇-丙酮-冰醋酸(9:0.5:0.5:0.5)為展開劑，展開后，晾干，噴以30%硫酸乙醇液，在100℃加熱至斑點清晰。結果3種有關物質與原藥完全分離，Rf值適中，最低檢出量為0.2pg，且重復性好。采用薄層色譜法檢查復方氨酚烷胺顆粒中的有關物質(對氯苯乙酞胺)，使用0.5%梭甲基纖維素鈉(CMC)GF254硅膠板，以氯仿-丙酮-甲苯(13:5:2)為展開劑，紫外光燈254nm下檢視，結果檢出對氯苯乙酞胺雜質斑點與其它主藥成分斑點分離良好，空白樣品溶液的斑點對雜質斑點無干擾，重現性好，f值適中，能有效檢出有關物質。

　　中藥指紋圖譜分析

　　中藥指紋圖譜可有效反映中藥成分的復雜性，表征中藥質量。其作為中藥質量標準的一個方面，廣泛用于鑒別樣品的真偽或產地，有效成分研究等方面]。色譜法是中藥指紋圖譜的主流，主要有GC、HPLC、TLC等。TLC因其便宜、快速、開放性、靈活性等優點，用于中藥指紋圖譜分析。TLC的一大優勢是提供直觀形象的可見光或熒光圖像，特征圖像直觀，專屬性好，判斷速度快，非常適合基層日常分析與現場檢驗使用。廣藿香主要含萜類、黃酮類、醇、酸、銅、醛類等化合物，廣藿香不同提取部位具有不同的藥物效應。袁旭江等研究不同產地廣藿香藥材薄層色譜指紋圖譜的差別，取不同產地廣藿香樣品6個，采用TLC檢測其化學成分。結果，不同產地廣藿香揮發油部位中成分薄層色譜行為相似，不同產地廣藿香甲醇提取部位與石油醚提取部位成分則存在明顯差異。薄層掃描儀具有原位掃描功能，通過測量薄層色譜Rf值，原位紫外-可見吸收光譜，結合板上化學特征反應形成薄層掃描中藥指紋圖譜。崔淑芬等使用薄層掃描法測定不同品種和產地的甘草并建立了指紋圖譜，可快速判斷藥材品質，有效控制甘草質量。

　　譜析儀器小結

　　傳統TLC技術由于精密度和重現性均較差，曾一度被其他快速發展起來的分離分析技術所取代，然而20 世紀80年代以來，隨著薄層在色譜板、點樣技術、展開技術方面的發展，薄層色譜的規范化和儀器化程度大大提高。加之直觀、經濟、簡便的特點，將在中藥多樣品的分析中發揮更大的作用。